2024-09-05
Determinación del alcohol de azúcar en los alimentos mediante cromatografía líquida de alto rendimiento
1Método y principio
Determinado mediante cromatografía líquida de alto rendimiento con un detector RID y cuantificado mediante un método estándar externo.
2Configuración de los instrumentos y métodos experimentales
2.1 Configuración de los instrumentos
- No, no es así. | Configuración del sistema | Cuánto tiempo |
1 | P3210B Bombas de gradiente de alta presión binarias | 1 |
2 | CT3210 Horno de columna | 1 |
3 | AS3210 Muestreo automático | 1 |
4 | Detector de RI | 1 |
5 | 4.6*250 mm 5 μm Columna de aminoácidos | 1 |
6 | Estación de trabajo SmartLab | 1 |
Cuadro 1 Lista de configuraciones
2.2 Método experimental
2.2.1 Preparación de reactivos y estándares
- No, no es así. | Reactivos | Purificación |
1 | Acetonitrilo | Cromatográficamente puro |
2 | 4 tipos de mezclas de edulcorantes | 40 g/l |
Cuadro 2 Lista de reactivos y normas
Curva estándar: el estándar mezclado (40 mg/ml) de los cuatro edulcorantes se diluyó con agua hasta una concentración de 1,6 mg/ml, 2,4 mg/ml, 3,2 mg/ml, 4,0 mg/ml, 4,8 mg/ml.0 mg/mL serie de curvas de trabajo de concentración.
2.22 Condiciones de cromatografía
Columna de cromatografía | Columna de aminoácidos, 4,6*250 mm, 5 μm | ||
Fase móvil | Acetonitrilo: agua = 80:20 | ||
Tasa de flujo | 1 ml/min | ||
Temperatura | 30 °C | Temperatura de la célula | 40 °C |
Volumen de la inyección | 20 μl |
Cuadro 3 Condiciones de cromatografía
2.2.3 Tratamiento previo de las muestras
Las muestras de bebidas no proteicas no deben ser inferiores a 200 ml y deben colocarse en un recipiente hermético después de haberse mezclado completamente.y fijar el volumen a 50 ml con agua, se agitan bien y se detectan en una máquina después de pasar a través de una membrana de filtro de 0,22 μm.
3Resultados experimentales
3.1 Adecuación del sistema
Figura 1 Cromatograma de mezcla de edulcorantes estándar de 6,0 mg/mL
Las notas:Como muestra la figura, hay picos de buena forma de eritritol, xilitol, sorbitol y maltitol, y no hay otros picos alrededor de los picos objetivo, que cumplen con los requisitos experimentales.
3.2 Linealidad
Figura 2 Curva estándar del eritritol
Figura 3 Curva estándar del xilitol
Figura 4 Curva estándar del sorbitol
Figura 5 Curva estándar de la maltosa
Las concentraciones de las curvas estándar de mezcla de los cuatro edulcorantes son 1,6 mg/mL, 2,4 mg/mL, 3,2 mg/mL, 4,0 mg/mL, 4,8 mg/mL y 6,0 mg/mL.los coeficientes de correlación lineal de las curvas estándar de cuatro edulcorantes son superiores a 0.999, que cumplió con los requisitos experimentales.
3.3 Repetibilidad
Figura 6 Cromatograma de repetibilidad de 6 inyecciones de 3,2 mg/mL Estándar de mezcla de edulcorantes
Tiempo de conservación |
- No, no es así. |
El eritritol |
El xylitol |
El sorbitol |
El maltitol |
1 |
8.407 |
11.365 |
15.637 |
36.644 |
|
2 |
8.414 |
11.374 |
15.638 |
36.658 |
|
3 |
8.415 |
11.377 |
15.644 |
36.645 |
|
4 |
8.412 |
11.374 |
15.638 |
36.635 |
|
5 |
8.426 |
11.391 |
15.670 |
36.696 |
|
6 |
8.436 |
11.405 |
15.680 |
36.701 |
|
RSD (%) |
0.128 |
0.128 |
0.120 |
0.077 |
Cuadro 4 6 Inyecciones de la repetibilidad del tiempo de retención
Área de pico |
- No, no es así. | El eritritol | El xylitol | El sorbitol | El maltitol |
1 | 228.976 | 239.243 | 234.601 | 224.837 | |
2 | 230.029 | 238.083 | 239.130 | 224.900 | |
3 | 224.656 | 237.784 | 236.914 | 222.373 | |
4 | 227.415 | 239.595 | 238.192 | 222.414 | |
5 | 227.455 | 240.591 | 238.963 | 223.679 | |
6 | 228.492 | 239.876 | 237.412 | 227.865 | |
RSD (%) | 0.809 | 0.450 | 0.705 | 0.913 |
Cuadro 5 6 Inyecciones de repetibilidad de área pico
Nota: Como muestra la tabla, el tiempo de retención RSD del eritritol, xilitol, sorbitol y maltitol es de 0,128%, 0,128%, 0,120%, 0,077%, y la repetibilidad del tiempo de retención fue inferior al 0,2%,que cumplió con los requisitos experimentalesLas RSD de la zona pico del eritritol, xilitol, sorbitol y maltitol son 0,809%, 0,450%, 0,705% y 0,913%.que cumplió con los requisitos experimentales.
3.4 Límites de detección
Figura 7 Cromatograma de 1,6 mg/mL para mezclar el edulcorante
Nota: Como se muestra en la figura 7, la concentración de 1,6 mg/ml de mezcla de edulcorantes estándar, el triple SNR se calcula a partir de los límites de detección de eritritol, xilitol, sorbitol y maltitol que son 0.01 mg/mL, 0,012 mg/ ml, 0,015 mg/ ml y 0,03 mg/ ml, que cumplen los requisitos experimentales.
3.5 Bebidas no proteicas de marca
Figura 8 Cromatograma de una bebida de marca en 2 inyecciones
Muestras | Área de pico |
Muestra 1 | 209.594 |
Muestra 2 | 209.001 |
Valor medio aritmético | 209.298 |
Cuadro 6 2 Inyecciones para una bebida de marca
Como muestra el cromatograma, se detecta eritritol en una bebida de marca y no se detecta xilitol, sorbitol y maltitol.Los datos del cuadro son los resultados de dos ensayos con una diferencia absoluta de 00,14% de la media aritmética, que es inferior al 10% del requisito estándar.
3.6 Atención
Dado que el detector del índice de refracción diferencial es sensible a la densidad de la solución, se recomienda que la fase móvil se premezcle al realizar el experimento.
4 Conclusión
El método analítico introducido en el presente artículo hace referencia a la norma nacional GB 5009.279-2016 (Determinación del xilitol, el sorbitol, el maltitol y el eritritol en los alimentos),mediante el uso de un cromatógrafo líquido de alto rendimiento de la serie Wayeal LC3200 con detector RIDLos resultados experimentales mostraron que la prueba adaptativa del sistema de eritritol, xilitol, sorbitol y maltitol, los picos son buenos y no hay otros picos alrededor de los picos objetivo.Los RSD para el tiempo de retención son 0.128%, 0.128%, 0.120% y 0.077%, todos menos de 0.2%. Las RSD del área de pico son 0.809%, 0.450%, 0.705%, 0.913% y menos de 1%. SNR = 3 como límite de detección, luego límites de detección de eritritol,el xylitol, el sorbitol y el maltitol son 0,01 mg/mL, 0,012 mg/mL, 0,015 mg/mL y 0,03 mg/mL respectivamente. La diferencia absoluta entre las dos mediciones es del 0,14% de la media aritmética,que es inferior al 10% del requisito estándarTodos los datos anteriores muestran que los resultados satisfacen los requisitos experimentales.
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