Determinación de los Componentes de Azúcar en Cultivos Oleaginosos por Cromatografía Iónica

Este estudio emplea cromatografía iónica para determinar el contenido de fructosa, glucosa, sacarosa, estaquiosa y rafinosa en los cultivos oleaginosos.El autor utilizó un cromatógrafo iónico Wayeal equipado con un detector amperométricoEste método presenta un pretratamiento simple, una excelente recuperación y una alta sensibilidad, lo que lo hace adecuado para la determinación de la fructosa.,contenido de glucosa, sacarosa, estaquiosa y rafinosa en las semillas oleaginosas según lo especificado en la norma.

Palabras clave: semillas de aceite, cromatografía iónica, azúcares.

1Instrumentos y reactivos

1.1 Lista de configuraciones de la cromatografía iónica

Cuadro 1 Lista de configuraciones de los instrumentos

1.2 Reactivos y soluciones estándar

Cuadro 2 Cuadro de reactivos y normas

1.3 Material experimental y equipo auxiliar

Configuración de filtración

Limpiador ultrasónico

Balanza analítica (precisión de 0,0001 g)

Jeringuilla desechable (2 ml)

Filtro de jeringa acuosa (0,22 μm)

Agua ultrapura, con una resistividad de 18,2 MΩ·cm (25°C)

2Método de experimento

2.1 Preparación de la solución

2.1.1 Solución de acetato de zinc (1 mol/L): Pesar 21,9 g de acetato de zinc, añadir 3 ml de ácido acético glacial, disolver y diluir hasta 100 ml con agua.

2.1.2 Solución de ferrocianuro de potasio (1 mol/L): Se pesan 10,6 g de ferrocianuro de potasio, se disuelven y se diluyen a 100 ml con agua.

2.1.3 Solución de hidróxido de sodio (200 mmol/L): medir 10,5 ml de solución de hidróxido de sodio al 50%, diluir hasta 1000 ml con agua pre-desgasificada y proteger con gas nitrógeno.

2.2 Tratamiento previo de las muestras

2.2.1 Extracción de muestras

Pesar 5 g de la muestra (con una precisión de 0,1 mg), colocarla en un tubo centrífugo de 50 ml con tapón, añadir 25 ml de éter de petróleo, girar durante 1 minuto, centrifugar a 2000 r/min durante 5 minutos,y desechar la capa superior del éter de petróleoRepita los pasos anteriores dos veces. Evapore el éter de petróleo residual en un baño de agua a 60 °C. Transfiera la muestra a un matraz cónico de 150 ml (previamente a peso constante) con una varilla de vidrio.Enjuagar el tubo centrífugo dos veces con 50 ml de agua., y mezclar los enjuagues en el frasco cónico, añadiendo lentamente 5 ml de solución de acetato de zinc y 5 ml de solución de ferrocianuro de potasio, respectivamente.añadir agua hasta que la masa total de la solución sea de aproximadamente 100 g (con una precisión de 1 mg). Después de agitar a temperatura ambiente durante 30 minutos, filtrar la solución a través de papel filtrante rápido de calidad.Al mismo tiempo, realizar un ensayo en blanco.

2.3 Condiciones de los experimentos

2.3.1 Condiciones de cromatografía

Fase móvil: A: 200 mm NaOH; B: agua; C: 20 mm NaOH

Cantidad de flujo: 0,4 ml/min

Tiempo de funcionamiento: 65 min.

Temperatura de la columna: 30°C

Temperatura de la zona de detección: 30°C

Detector: electrodo de oro, azúcares, potencial cuádruple

Volumen de la inyección: 10 μl

Cuadro 3 Elución del gradiente

3Resultado del experimento.

3.1 Cromatograma estándar

La separación de cinco azúcares se completó en 20 minutos, con todos los picos que muestran buena forma, sin fenómenos de cola, y todos los compuestos que muestran una excelente respuesta,que cumplen los requisitos para la determinación experimental.

Figura 1 Cromatograma de 5 azúcares (0,5 mg/l)

Cuadro 4 Resultados de idoneidad del sistema

3.2 Alcance lineal

Se toma una cantidad adecuada de la solución estándar mezclada y se realiza una dilución en serie para preparar una serie de concentraciones para la construcción de la curva estándar.La desviación entre los resultados de detección lineal y las concentraciones conocidas es menor que la desviación máxima admisibleLos valores de R2 oscilan entre 0,99985 y 1.00000, lo que indica una excelente linealidad para todos los componentes.

Cuadro 5 Cuadro de rango lineal para cada compuesto

Fig. 2 Resultados lineales para cinco azúcares

3.3 Precisión

La solución de muestra de soja se extrajo de acuerdo con el punto 2.2.1 y analizados en las condiciones instrumentales especificadas en la sección 2.3.1 con seis inyecciones consecutivas. Los resultados se muestran en la tabla siguiente. Las desviaciones estándar relativas (DRA) de los cinco azúcares de la muestra de soja fueron todas de un 1%.La detección de la muestra es fiable, y el método demuestra una buena precisión.

Cuadro 3 Resultados de precisión de las muestras de soja

Fig. 3 Cromatogramas superpuestos de cuatro azúcares Precisión en la soja

3.4 Resultado del ensayo de muestra

3.4.1 Detección de humedad

Se tomarán las muestras de soja y sésamo a ensayar y se determinará el contenido de humedad de las muestras de acuerdo con GB/T 14489.1Los resultados se muestran en el cuadro siguiente.

Cuadro 4 Resultados de la humedad de las muestras

3.4.2 Pruebas de muestras

Se tomarán las muestras de soja y sésamo a analizar, se extraerán las soluciones de muestra de acuerdo con el punto 2.2.1, y realizar el análisis de inyección en las condiciones instrumentales especificadas en la sección 2.3.1Los resultados de las pruebas de muestra se muestran en la siguiente tabla. La detección de las muestras de soja y sésamo es fiable y los resultados son satisfactorios.

Cuadro 5 Resultado del ensayo de muestra

Figura 4 Cromatograma de ensayo de muestra de soja diluida 200 veces

Figura 5 Cromatograma de ensayo de la muestra de sésamo diluida 100 veces

4Conclusión

Este método utiliza un sistema de cromatografía iónica Wayeal de la serie IC6300 equipado con un detector amperométrico para establecer un método cromatográfico iónico para la determinación de fructosa, glucosa,el azúcarLas muestras fueron tratadas mediante pretratamiento, separadas mediante una columna de cromatografía iónica y cuantificadas mediante el método estándar externo.que permite el análisis cualitativo y cuantitativo de la fructosaLos datos indican que todos los picos cromatográficos presentan una forma excelente sin cola,la sensibilidad cumple los requisitos de las normas nacionales, y los coeficientes de correlación lineal son todos superiores a 0.999Esto demuestra que el método, junto con el sistema de cromatografía iónica de Wanyeal, cumple con los requisitos de detección cualitativa y cuantitativa de rutina para las muestras objetivo.