Determinación de Siete Parabenos en Alimentos por Cromatografía Líquida

Los parabenos (p-hidroxibenzoatos), como clase de conservantes altamente efectivos y de amplio espectro, se utilizan ampliamente en los campos de la alimentación (como salsa de soja, vinagre, bebidas, mermelada, etc.), cosméticos y productos farmacéuticos. Su eficacia antibacteriana y seguridad impactan directamente en la estabilidad del producto y la salud del consumidor. Este experimento se refiere a la "GB 5009.31-2025 Norma Nacional de Seguridad Alimentaria — Determinación de Parabenos en Alimentos", utilizando el sistema de cromatografía líquida de alto rendimiento de la serie Wayeal LC3500, equipado con un detector DAD para el análisis.

Palabras clave: aditivos alimentarios; parabenos; p-hidroxibenzoatos; cromatografía líquida de alto rendimiento.

1. Instrumentos y reactivos

1.1 Lista de configuración de cromatografía líquida de alto rendimiento

Tabla 1 Lista de configuración de instrumentos

1

1.2 Reactivos y estándares

Grado analítico

1.3 Material experimental y equipo auxiliar

Balanza analítica

Limpiador ultrasónico

Mezclador Vortex

2. Método experimental

2.1 Preparación de reactivos

2.1.1 Solución de trabajo estándar mixta de compuestos de parabenos: Pipetear adecuadamente el estándar mixto de compuestos de parabenos y diluirlo con metanol-agua al 30% para preparar soluciones de trabajo estándar mixtas con concentraciones de masa de 0,2 mg/L, 0,5 mg/L, 1,0 mg/L, 2,0 mg/L, 5,0 mg/L, 10 mg/L, 20 mg/L y 50 mg/L, respectivamente.

2.1.2 Pretratamiento de la muestra:

Pesar 5 g (con precisión de 0,01 g) de la muestra en un tubo de centrífuga graduado de 50 ml (las bebidas carbonatadas requieren desgasificación ultrasónica en un limpiador ultrasónico durante 10 minutos antes de pesar). Agregar 30 ml de solución de metanol-agua (3+7), mezclar en Vortex durante 3 minutos y sonicar durante 20 minutos. Luego, agregar solución de metanol-agua (3+7) para llevar el volumen total a 40 ml. Centrifugar a 6000 rpm durante 3 minutos, filtrar el sobrenadante y tomar el filtrado para la purificación. Activar la columna de extracción en fase sólida (SPE) secuencialmente con 5 ml de metanol y 5 ml de agua. Transferir la solución a purificar a la columna SPE activada. Enjuagar la columna secuencialmente con 5 ml de agua y 5 ml de solución de metanol-agua (3+7), luego eluir con 6 ml de metanol. Recoger el eluido, diluir a 10 ml con agua, filtrar a través de una membrana e inyectar en el cromatógrafo líquido de alto rendimiento para su análisis.

3. Resultado del experimento

3.1 Prueba de idoneidad del sistema

Fig. 1 Cromatograma de la solución de trabajo estándar para compuestos de parabenos

n.a.

La prueba de idoneidad del sistema demuestra que cada pico cromatográfico exhibe buena forma, altos números de placa teórica, sin interferencia de los picos de impurezas circundantes y valores de resolución todos mayores a 1.5, cumpliendo con los requisitos experimentales.

3.2 Prueba de repetibilidad

Fig. 2 Cromatograma de la prueba de repetibilidad de 1.0 mg/L de compuesto de parabeno (6 inyecciones)

0.901

La prueba de repetibilidad mostró que después de seis inyecciones consecutivas de la solución de trabajo estándar de compuesto de parabeno de 1.0 mg/L, la repetibilidad del tiempo de retención fue inferior al 0.2% y la repetibilidad del área del pico fue inferior al 1.0%, lo que indica una buena repetibilidad.

3.3 Prueba de linealidad

Fig. 3 Cromatograma de la prueba de curva estándar

La prueba de linealidad demuestra que dentro del rango de 0.2–50 mg/L, las curvas estándar mixtas para los siete compuestos de parabenos exhiben todos coeficientes de correlación lineal mayores a 0.9999, lo que indica una excelente linealidad.

3.4 Prueba de exactitud

Fig. 4 Cromatograma de la prueba de exactitud

104.8

La prueba de exactitud demostró que las recuperaciones de los siete compuestos de parabenos en las muestras añadidas oscilaron entre el 97.6% y el 104.8%, lo que indica una buena exactitud.

3.5 Prueba de una bebida de marca

Fig. 5 Cromatograma de la prueba de una bebida de marca

Las pruebas de muestra indicaron que los siete compuestos de parabenos no se detectaron en la bebida de una determinada marca.

4. Conclusión