Determinación de los fosfatos múltiples en los alimentos por cromatógrafo iónico Wayeal

Esta nota de aplicación presenta la determinación de múltiples fosfatos en alimentos según el Método 2 de GB 5009.256-2025 utilizando el sistema de cromatografía iónica de Wayeal.

La ingesta excesiva de fosfatos puede alterar el metabolismo calcio-fósforo del cuerpo, provocando una absorción deficiente de minerales u otros problemas de salud. La detección precisa ayuda a las empresas a controlar científicamente el uso de aditivos, equilibrar la calidad y la seguridad de los alimentos y proporciona respaldo de datos para optimizar las formulaciones.

Palabras clave:Cromatografía iónica, aniones, alimentos.

1. Instrumento y Regentes

1.1 Lista de configuración del cromatógrafo iónico

Tabla 1 Lista de configuración del instrumento

1.2 Reactivos y Estándares

Tabla 2 Lista de reactivos y estándares

1.3 Material de experimentación y equipo auxiliar

Filtro hidrófilo tipo jeringa enlatado (0,45 μm)

Inyector (20 ml)

2. Método de experimento

2.1 Pretratamiento de la muestra

Pese 1-2 g (con una precisión de 0,001 g) de la muestra en un tubo colorimétrico de 50 ml. Agregue 22,5 ml de solución de hidróxido de sodio de 100 mmol/l. Mezcle con vórtex durante 1 minuto, luego extraiga ultrasónicamente a 80 °C durante 30 minutos, agitando cada 5 minutos para asegurar la dispersión completa de la muestra. Después de enfriar a temperatura ambiente, diluir hasta 50 ml con agua ultrapura y mezclar bien. Transfiera toda la solución a un tubo de centrífuga de 50 ml y centrifugue a 8000 r/min durante 5 minutos. Mida 5 ml del sobrenadante en otro tubo colorimétrico de 50 ml, agregue 1 ml de ácido nítrico al 30 % y agite para mezclar. Coloque el tubo en un baño de agua a 90 °do± 5 °C y calentar durante 60 minutos. Después de calentar, retire el tubo y enfríelo a temperatura ambiente en un baño de agua fría. Finalmente diluir hasta la marca con agua y mezclar bien.

Pipetee 2 ml de la solución en un tubo de centrífuga de 10 ml y luego diluya hasta la marca con agua ultrapura. Coloque el tubo en una centrífuga refrigerada y centrifugue a 4 °C y 8.000 r/min durante 5 minutos. Recoger el sobrenadante y pasarlo por un 0,45µm membrana filtrante. Luego, tomar un volumen apropiado del filtrado para el análisis instrumental.

Nota: En el método estándar original, se añaden por separado 45 ml de solución de hidróxido de sodio de 50 mmol/l. Para esta prueba, para facilitar el ajuste volumétrico debido a la mayor cantidad agregada, la solución de extracción se modificó a 22,5 ml de solución de hidróxido de sodio de 100 mmol/L agregados por separado. Esta modificación no afecta la validez de los resultados experimentales.

2.2 Condiciones del experimento

Tabla 3 Condiciones de prueba de aniones

3. Resultado del experimento

3.1 Cromatografía estándar

La determinación de múltiples fosfatos en los alimentos según el Método 2 de GB 5009.256-2025 se completó en 30 minutos. Los resultados de la prueba demostraron buena linealidad y repetibilidad lineal, excelentes límites de detección y cuantificación, precisión satisfactoria, fuerte repetibilidad de la muestra, paralelismo confiable de la muestra, repetibilidad consistente de la muestra enriquecida y excelentes tasas de recuperación. Todos los indicadores de rendimiento cumplen con los requisitos especificados en GB 5009.256-2025 para la determinación de múltiples fosfatos en alimentos.

Cromatograma de superposición de la curva estándar

3.2 Rango lineal

Tome una cantidad adecuada de la solución estándar y dilúyala para preparar la curva de calibración. La desviación entre los resultados de la detección lineal y las concentraciones conocidas fue menor que la desviación máxima permitida, con un valor R superior a 0,999, lo que indica una linealidad excelente para cada componente.

Tabla 4 Tabla de rango lineal para iones fosfato

Resultados de linealidad para iones fosfato

3.3 Prueba de repetibilidad de linealidad

Cromatogramas de prueba de repetibilidad para el punto de valor bajo S1 de la curva estándar con 7 inyecciones consecutivas

Cromatogramas de prueba de repetibilidad para el punto de valor medio de curva estándar S4 con 7 inyecciones consecutivas

Cromatogramas de prueba de repetibilidad para el punto de alto valor S7 de curva estándar con 7 inyecciones consecutivas

Datos de prueba de repetibilidad para la curva de calibración

3.4 Prueba de LOD

Cromatograma de prueba LOD

Datos de prueba LOD

3.5 Prueba de precisión

Cromatogramas superpuestos de dos pruebas independientes

Datos de prueba de precisión

3.6 Cromatograma de prueba de muestra en blanco

Cromatograma de prueba de muestra en blanco

Datos de prueba de muestra en blanco

3.7 Cromatogramas de prueba de repetibilidad y paralelismo de muestras

Cromatogramas superpuestos de muestra paralela 1 de camarones congelados (8 inyecciones)

Cromatogramas superpuestos de muestra paralela 2 de camarones congelados (8 inyecciones)

Datos de prueba de camarones congelados

3.8 Prueba de repetibilidad de picos y picos de muestra

Cromatograma superpuesto de camarones congelados con 50 % de púas (8 inyecciones)

Datos de prueba de repetibilidad para camarones congelados con un nivel de pico del 50%

Cromatogramas superpuestos de camarones congelados con un nivel de pico del 100 % (8 inyecciones)

Datos de prueba de repetibilidad para camarones congelados con un nivel de pico del 100%

Cromatogramas superpuestos de camarones congelados con un nivel de pico del 150 % (8 inyecciones)

Datos de pruebas de reproducibilidad para camarones congelados con un nivel de pico del 150%

Datos de pruebas de aumento de camarones congelados

Según los datos proporcionados, los picos cromatográficos demuestran buena forma y los coeficientes de correlación lineal son todos superiores a 0,999. La determinación de fosfatos en alimentos se llevó a cabo utilizando la columna cromatográfica de hidróxido de hidrógeno de NovaChrom (HS-9A-PP, 4 × 250 mm, 9 μm), con referencia al segundo método especificado en GB5009.256-2025 para la determinación de múltiples fosfatos en alimentos. Los resultados experimentales demuestran que el segundo método exhibe una excelente linealidad y reproducibilidad lineal. También muestra un límite de detección (0,003 g/kg), un límite de cuantificación (0,009 g/kg) y una precisión excepcionales. El método demuestra buena repetibilidad, paralelismo de muestras y excelentes tasas de recuperación de picos. Tanto el límite de detección como el límite de cuantificación están muy por debajo de los requisitos estándar de 0,05 g/kg y 0,1 g/kg, respectivamente. La RSD de las áreas de los picos para la repetibilidad de la muestra osciló entre 0,515% y 0,934%. La diferencia absoluta entre las dos determinaciones independientes obtenidas en condiciones de repetibilidad para la muestra fue del 0,37% de la media aritmética. En pruebas de precisión, la diferencia absoluta entre las dos determinaciones independientes obtenidas en condiciones de repetibilidad fue del 0,06% de la media aritmética, lo que no supera el requisito estándar del 15%. Las tasas de recuperación oscilaron entre el 92,57% y el 102,15%. Este método cumple con los requisitos de GB5009.256-2025 para la determinación de múltiples fosfatos en alimentos.

4. Conclusión

Este análisis se realizó utilizando un cromatógrafo iónico Wayeal para determinar múltiples fosfatos en los alimentos según el Método 2 de GB5009.256-2025. El método permite cuantificar con precisión el contenido de fosfato en los alimentos, verificando su cumplimiento con las normas nacionales (como GB 5009.256-2025). Esto ayuda a evitar que las empresas excedan los límites de aditivos permitidos y respalda la integridad de los sistemas regulatorios de seguridad alimentaria.